北京六一生物科技有限公司
分光光度計(jì)是實(shí)驗(yàn)室常用的精密儀器，在醫(yī)院中有著廣泛的應(yīng)用，主要用于測(cè)量溶液的濃度。分光光度計(jì)屬于計(jì)量強(qiáng)制檢定項(xiàng)目，檢定周期應(yīng)＜1年。目前的檢定規(guī)程為中華人民共和國(guó)國(guó)家計(jì)量檢定規(guī)程“紫外、可見(jiàn)、近紅外分光光度計(jì)檢定規(guī)程”該規(guī)程對(duì)自動(dòng)掃描型儀器的檢定方法描述并不多，有些參數(shù)不可設(shè)置，在此介紹一些檢定技巧。
分光光度計(jì)測(cè)量原理
分光光度計(jì)的基本測(cè)量原理是朗伯-比爾定律，意味著一定波長(zhǎng)的單色光通過(guò)溶液時(shí)溶液對(duì)光的吸收度與溶液自身的濃度以及液層的厚度成正比。分光光度計(jì)通過(guò)光柵或棱鏡來(lái)生成不同波長(zhǎng)的單色光，通過(guò)待測(cè)溶液后，檢測(cè)出射光的強(qiáng)度，再經(jīng)過(guò)信號(hào)處理，即可得到溶液的吸光度或透射比。通常需測(cè)量其中的一項(xiàng)。由于其分光能力很強(qiáng)，其波長(zhǎng)范圍可以達(dá)到數(shù)個(gè)nm，甚至更窄，從而提高了分析的靈敏度、準(zhǔn)確度和波長(zhǎng)范圍，使得分光光度計(jì)在化學(xué)分析中得到廣泛的應(yīng)用。
計(jì)量中的常見(jiàn)問(wèn)題與使用技巧
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的對(duì)比設(shè)定值：波長(zhǎng)準(zhǔn)確度的測(cè)量在規(guī)程中指定了9種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可供選擇。由于濾光片使用方便，價(jià)格低廉，成為應(yīng)用最廣泛的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。通常采用氧化鈥濾光片，通過(guò)全波段掃描，找到其吸光度出現(xiàn)波谷的波長(zhǎng)，然后與給定值進(jìn)行比較，可得到波長(zhǎng)示值誤差的數(shù)值。需要說(shuō)明的是，雖然氧化鈥具有固定的參考波長(zhǎng)，但在實(shí)際計(jì)算中應(yīng)選用具有標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)校準(zhǔn)資格的機(jī)構(gòu)校準(zhǔn)的波長(zhǎng)為準(zhǔn)，并應(yīng)定期進(jìn)行校正。
濾光片標(biāo)號(hào)的含義：測(cè)量雜散光時(shí)，需要用到波長(zhǎng)分別為220 nm、360nm和420nm的截止濾光片。截止濾光片上印有編號(hào)，編號(hào)的數(shù)字×10即為標(biāo)稱測(cè)試波長(zhǎng)。所以應(yīng)選擇22號(hào)、36號(hào)和42號(hào)截止濾光片。截止濾光片類似于一個(gè)高通濾波器，其截止波長(zhǎng)應(yīng)分別≥225 nm、365 nm和430nm。同理，干涉濾光片也是以編號(hào)數(shù)字×10作為標(biāo)稱峰值波長(zhǎng)，中性濾光片以編號(hào)數(shù)字×10作為標(biāo)稱透射比。
