雙光束紫外可見分光光度計(jì)是依據(jù)物質(zhì)在紫外、可見光區(qū)的吸收光譜特性和朗伯-比爾定律的原理,對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析的儀器&,器廣泛應(yīng)用于石油’醫(yī)藥、化工、衛(wèi)生防疫等部門。為確保儀器出具數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠,必須經(jīng)過計(jì)量
部門的周期檢定,對(duì)使用頻率高對(duì)儀器技術(shù)指標(biāo)要求高的部門,要經(jīng)常對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)。
1、雙光速紫外可見分光光度計(jì)使用過程要經(jīng)常進(jìn)行基線校正:對(duì)儀器進(jìn)行各項(xiàng)校準(zhǔn)前一定要校準(zhǔn)基線。不同的儀器操作不同,有的是點(diǎn)“baseline”有的是點(diǎn)“zero”還有其他操作方法。
2、基線平直度的測(cè)量:做完“校準(zhǔn)基線”后即測(cè)量此項(xiàng)指標(biāo)。要想得出準(zhǔn)確的結(jié)果,條件設(shè)定很關(guān)鍵,選擇光度計(jì)的“波長(zhǎng)掃描”功能,波長(zhǎng)范圍:全波段;帶寬:2nm;掃描速度:中速;縱坐標(biāo)范圍的設(shè)定也很重要,單位選擇“透射比”,可設(shè)定為95%-105%或98%-102%,以便清晰看出100%線的變化。
3、波長(zhǎng)準(zhǔn)確度與重復(fù)性的測(cè)量:目前國(guó)際上使用的標(biāo)準(zhǔn)有汞燈、氧化鈥溶液或氧化鈥濾光片,這些標(biāo)準(zhǔn)都有較豐富的光譜峰,選用儀器的“波長(zhǎng)掃描”功能,宜用掃描速度慢,相應(yīng)時(shí)間小,這樣可以避免附加誤差。要特別注意“采樣間隔”的設(shè)定,為了準(zhǔn)確得出峰值波長(zhǎng)的數(shù)據(jù),宜采用“0.1nm”但有的無法設(shè)定“采樣間隔”,“波長(zhǎng)范圍”的起始波長(zhǎng)與終止波長(zhǎng)相隔不超過200nm才能得出準(zhǔn)確的峰值數(shù)據(jù),想要把氧化鈥濾光片的特征峰235-640nm掃描一遍,要分三段設(shè)定。大部分儀器可以直接設(shè)定所要的“采樣間隔”
4、透視比準(zhǔn)確度和重復(fù)性的測(cè)量:操作上使用儀器的“定量測(cè)量”功能,用戶使用儀器的該項(xiàng)功能較多,盡量選用“多波長(zhǎng)測(cè)量”。為保證測(cè)量準(zhǔn)確,應(yīng)正確使用標(biāo)準(zhǔn)溶液:
1)對(duì)測(cè)量用吸收池的要求,采用光徑長(zhǎng)度為10.00mm的石英池盛裝標(biāo)準(zhǔn)溶液,吸收池的兩透光面應(yīng)無劃痕、油漬或液體污染,否則會(huì)產(chǎn)生一些散射光甚至熒光干擾測(cè)量,安裝吸收池至樣品框架上應(yīng)遵循一定的方向,可按吸收池箭頭所標(biāo)方向正對(duì)入射光方向,以減少吸收池兩透光面的不平行性帶來的誤差。
2)必須事先對(duì)儀器波長(zhǎng)進(jìn)行校準(zhǔn)后,才能使用標(biāo)準(zhǔn)溶液測(cè)量透射比準(zhǔn)確度。
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